英文名稱 ： Protein Disulfide Bond Content Assay Kit
產品包裝 ： 盒裝
產品規(guī)格 ： 100T/48S
儲存條件 ： 2-8℃
檢測方法 ： 微量法
有 效 期 ： 6個月
產品組成：
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試劑名稱
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規(guī)格
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保存條件
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提取液一
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液體 40mL×1瓶
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2-8℃保存
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提取液二
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液體40mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑一
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液體120mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑二
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液體20mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑三
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液體6mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑四
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液體1.2mL×1瓶
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2-8℃保存
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粉劑一
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粉劑×1瓶
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2-8℃保存
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標準品
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粉劑×1 支
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2-8℃保存
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產品說明：
蛋白質是一類重要的生物大分子，存在于一切生物體內，是生命的基礎物質。二硫鍵是連接不同肽鏈或同一 肽鏈中，兩個不同半胱氨酸殘基的巰基的化學鍵。二硫鍵對蛋白質的結構影響很大，在蛋白質分子中，起著穩(wěn)定 肽鏈空間結構的作用，所以測定蛋白質二硫鍵含量尤為重要。
還原劑會使二硫鍵裂解,裂解后的巰基會發(fā)生親核反應， 即巰基與5,5’-二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應,生成黃色化合物，在412nm處有吸收峰，據(jù)此可以計算蛋白質二硫鍵含量。
注意：實驗之前建議選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者 增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、低溫離心機、研缽/勻漿器、丙酮(AR)、蒸餾水。
注意事項：
1.若樣本ΔA測定<0.01 ，可適當增大樣本量后測定，注意同步修改空白管和標準管及計算公式；若樣本ΔA測 定>1.5,可用試劑一稀釋沉淀溶解液后測定，注意同步修改計算公式中的稀釋倍數(shù)。
實驗實例：
1、取 100μL 馬血清，按照測定步驟操作，用 96 孔板測得 ΔA 測定=(A2測定-A1測定)-(A2 對照-A1 對照)=(0.348-0.113)-(0.047-0.045)=0.233 ，ΔA標準=A標準-A空白=0.417-0.105=0.312，按樣本液體體積計算蛋 白質二硫鍵含量得：
蛋白質二硫鍵含量(μmol/mL)= 1.25×ΔA 測定÷ΔA 標準×F =0.933μmol/mL。
2、取0.1036g鼠肝，按照測定步驟操作，用96孔板測得ΔA測定=(A2 測定-A1 測定)-(A2 對照-A1 對照)=(0.475-0.107)-(0.261-0.105)=0.212,ΔA 標準=A標準-A空白=0.417-0.105=0.312，按樣本質量計算蛋白質 二硫鍵含量得：
蛋白質二硫鍵含量(μmol/g質量)=0.125×ΔA測定÷ΔA 標準÷W×F =0.820μmol/g質量。
3、取 0. 1078g 黃豆粉，沉淀溶解液用試劑一稀釋 2 倍后， 按照測定步驟操作， 用 96 孔板測得ΔA測定=(A2 測 定-A1測定)-(A2對照-A1對照)=(0.762-0.084)-(0.123-0.070)=0.625 ，ΔA標準=A標準-A空白 =0.417-0.105=0.312，按樣本質量計算蛋白質二硫鍵含量得：
蛋白質二硫鍵含量(μmol/g質量)=0.125×ΔA測定÷ΔA 標準÷W×F =4.646μmol/g質量。
