水痘-帶狀皰疹病毒PCR試劑盒

品牌：紀寧生物
貨號：JN31034
規(guī)格： 50次

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產(chǎn)品詳情

水痘-帶狀皰疹病毒PCR試劑盒
產(chǎn)品及特點：
水痘-帶狀皰疹病毒(Varicella-Zoster Virus，VZV) 是一種兒童初次感染引起水痘，恢復(fù)后病毒潛伏在體內(nèi)，少數(shù)病人在成人后病毒再發(fā)而引起帶狀皰疹的病毒。水痘是具有高度傳染性的兒童常見疾病，多發(fā)于 2～6 歲，傳染源主要是患者，患者急性期水痘內(nèi)容物及呼吸道分泌物內(nèi)均含有病毒。曾患過水痘的病人引起帶狀皰疹后，初期局部皮膚有異常感，搔癢、疼痛，進而出現(xiàn)紅疹、皰疹，串連成帶狀，以軀干和面額部為多見，呈單側(cè)分布，病程約 3 周左右，少數(shù)可達數(shù)月之久，還有可能出現(xiàn)腦脊髓炎和眼結(jié)膜炎等并發(fā)癥。該病毒對人體健康有長期潛在危害，且該病毒可以有效檢測野生株和疫苗株，因此水痘-帶狀皰疹病毒的快速準確鑒定對該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用，本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)的水痘-帶狀皰疹病毒檢測試劑盒，
它具有下列特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增水痘-帶狀皰疹病毒，與其他病原沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。
規(guī)格及成分：

編號	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.0	1 mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（亮黃色）
試劑三	水痘-帶狀皰疹病毒 PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	水痘-帶狀皰疹病毒 PCR 陽性對照（1×10E8 /μL）	50 μL（黃蓋）
試劑五	使用手冊	1 份

運輸及保存：
低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其他試劑。
自備試劑：
樣品DNA。
使用方法：
一、樣品 DNA 的制備：
1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。可以選用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個樣品，則需要做N+2個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 水痘-帶狀皰疹病毒PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）：
3. 對N+2個樣品，在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照，故需要設(shè)置N+4個反應(yīng)。在N+4個PCR管中分別加入下列成分：

成份	N+2 個樣品管	PCR 陰性對照	PCR陽性對照
PCR Magic Mix 3.0	各 20μL	20μL	20μL
水痘-帶狀皰疹病毒PCR 引物混合液	各2μL	2μL	2μL
N+2個樣品DNA模板	各18μL	--	--
PCR 陰性對照（水）	--	18μL	--
PCR 陽性對照（水痘-帶狀皰疹病毒PCR陽性對照1000倍稀釋液）	--	--	18μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過程	溫度	時間
預(yù)變性	95℃	5 min
PCR 反應(yīng)35個循環(huán)	95℃	30 sec
	55℃	30 sec
	72℃	40 sec
最后延伸	72℃	7 min

三、電泳檢測：
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。

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水痘-帶狀皰疹病毒PCR試劑盒

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