產(chǎn)品詳情

BHK-21/C-13倉鼠腎成纖維細(xì)胞

基本信息

產(chǎn)品品牌 ： 紀(jì)寧生物

中文名稱 ： 倉鼠腎成纖維細(xì)胞

細(xì)胞簡(jiǎn)稱 ： BHK-21 [C-13]

細(xì)胞別稱： BHK 21; BHK21; Baby Hamster Kidney-21; Baby Hamster Kidney 21; BabyHamster Kidney from litter No. 21; BHK

細(xì)胞形態(tài) ： 成纖維細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性 ： 貼壁細(xì)胞P/S(PB180120)

培養(yǎng)環(huán)境 ： 空氣，95%；CO2，5%37℃

凍存條件 ： 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO液氮

完全培養(yǎng)基 ： MEM（含NEAA）(PM150410)＋10% FBS(164210-50)＋1%

傳代步驟

1、吸出原培養(yǎng)液。

2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。

3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞。

4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶。

5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。

6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm/min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。

7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。

8、消化時(shí)間 1~2分鐘

傳代比例（密度） ： 1:3-1:4

換液頻次 ： 2~3次/周

細(xì)胞背景描述

細(xì)胞背景描述 ： BHK-21 [C-13]的親本細(xì)胞株是由I·A·Macpherson和M·G·P·Stoker于1961年3月從1日齡的倉鼠建立的。隨后84天連續(xù)培養(yǎng)，僅中斷8天進(jìn)行凍存，通過單細(xì)胞分離建立了13號(hào)克隆，即BHK-21 [C-13]。BHK-21 [C-13]細(xì)胞可用作轉(zhuǎn)染宿主，用于表達(dá)包含選擇及擴(kuò)增標(biāo)記的DNA的載體。

倍增時(shí)間 ： ~12 hours

供體年齡 ： 1日齡

組織來源 ： 正常腎

細(xì)胞類型 ： 自發(fā)永生化細(xì)胞

生物安全等級(jí)  ：1

BHK-21/C-13倉鼠腎成纖維細(xì)胞
收到常溫細(xì)胞后如何處理保存

細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照紀(jì)寧生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南

1.收到常溫細(xì)胞后，及時(shí)拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。

2.用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)

胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用

基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4.靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)

依據(jù)）。建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。

5.若觀察到異常或者對(duì)細(xì)胞有疑問，請(qǐng)及時(shí)跟我們聯(lián)系。對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)。可跟我們的技術(shù)支持交流。