53910-25-1 / 脫氧助間型霉素的合成和純化方法

背景及概述^[1]

脫氧助間型霉素又叫噴司他丁，化學名為(8R)-3-(2-脫氧-β-D-赤-戊呋喃糖基)-3，4，7，8-四氫咪唑并[4，5-d][1，3]二氮雜草-8-醇，是擬嘌呤類的抗腫瘤藥，主要用于毛細胞白血病(hairy cell leukemia，縮寫HCL)等的治療。

提取純化方法^[1]

用氫氧化鈉溶液將噴司他丁發酵液的pH調至7.9，加入3％(w/v)珍珠巖助濾劑，經板框過濾，得到噴司他丁濾液。將700ml D261樹脂(上海華震科技貿易公司生產)裝入Φ50X400mm的層析柱中，對樹脂進行酸洗(2升2mol/L鹽酸浸泡6小時)、水洗(純化水洗滌至中性)、堿洗(2升2mol/L氫氧化鈉浸泡6小時)、水洗(純化水洗滌至中性)，得到預處理的D261樹脂。取5升噴司他丁濾液，以每分鐘25ml的速率泵入層析柱，收集流出液A。濾液全部上完后再泵入1300ml升純化水，淋洗層析柱，收集流出液B。合并流出液A、B，呈淺黃色，而噴司他丁的回收率為96.8％。

合成方法^[2]

步驟1：3-((2R,4S,5R)-4-羥基-5-(羥甲基)-四氫-呋喃-2-基)-6,7-二氫咪唑 并[4,5-d]-[1,3]二氮雜卓-8(3H)-酮的合成

將1.5g氯化鉀溶解于pH 8.0的0.5l 20mM磷酸鹽緩沖液中。然后，在攪拌下加入 10g 2'-脫氧尿苷和20ml核苷脫氧核糖基轉移酶溶液(10mg/ml)。將所得的溶液加熱至25- 30℃，并加入2.0g 6,7-二氫咪唑并[4,5-d][1,3]二氮雜卓-8(3H)-酮鹽酸鹽單二甲基亞 砜。將反應混合物在25-30℃攪拌3小時。使用低壓反相柱色譜法純化所得的產物，以獲得 1.58g(78％)純物質(通過HPLC測定，純度大于99％)。

步驟2：(R)-3-((2R,4S,5R)-4-羥基-5-(羥基甲基)-四氫-呋喃-2-基)-3,6,7, 8-四氫咪唑并[4,5-d]-[1,3]二氮雜卓-8-醇(即，噴司他丁)的合成。

在N2氣氛下，將1.0g 3-((2R,4S,5R)-4-羥基-5-(羥甲基)-四氫呋喃-2-基)-6,7- 二氫咪唑并[4,5-d]-[1,3]二氮雜卓-8(3H)-酮加入至含有20mgRuCl(對傘花烴)[(R,R)- Ts-DPEN]的燒瓶中。加入10ml三乙胺和3.3ml甲酸的脫氣混合物。將反應混合物在N2吹掃下 在40℃攪拌1天，直至達到>99％的轉化(如通過HPLC測定)。然后，將反應混合物倒入200ml pH 7.5的100mM磷酸鹽緩沖液中。使用低壓反相柱色譜法純化產物，以獲得0.84g(83％)純 的噴司他丁，其具有約1000:1的8R/8S異構體比例(如通過HPLC測定)。

參考文獻

[1] [中國發明] CN200910096059.4 一種噴司他丁的提取純化方法

[2] [中國發明] CN201680039712.1 用于合成噴司他丁的方法